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木瓜raybet雷竞技酶活力测定检测方法,干货分享!

作者: 编辑: 来源: 发布日期: 2019.07.02
信息摘要:
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木瓜raybet雷竞技是从番木瓜浆中提取的一种植物来源raybet雷竞技,具有酶活高、热稳定性好、可应用于肉类嫩化、嫩肉粉、大豆肽、肉类水解、胶原蛋白肽、酵母抽提物生产中,是一种广谱性的蛋白雷竞技。精准的酶活力检测,可以减少因酶活波动造成的产品质量波动,降低生产成本,同时有助于监控生产环节,及时发现问题,因此,掌握好木瓜raybet雷竞技酶活力测定检测方法是必不可少的一个环节。

木瓜raybet雷竞技活力检测原理 
木瓜raybet雷竞技在一定的温度与PH条件下,水解酪蛋白底物,然后加入三氯乙酸终止酶反应, 并将未水解的酪蛋白沉淀除去,滤液对紫外光有吸收,可用紫外分光光度法测定,根据吸光 度计算其酶活力。

木瓜raybet雷竞技酶活定义 
在一定温度(40℃)和 pH 6.0条件下,1min 水解酪蛋白产生 1μg酪氨酸所需的酶量为一个酶活力单位,以U/G表示。

酶活检测的仪器与设备
1、恒温水浴锅:精度为40土0.1℃。 
2、紫外分光光度计 波长275nm
3、漩涡混合器
4、电子天平(0.001g) 

 木瓜raybet雷竞技酶活力检测恒温水浴设备

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酶活检测试剂和溶液 
1、0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液 
称取17.9g十二水磷酸氢二钠溶于水中,稀释到1000mL。 

3、0.05mol/L柠檬酸溶液 
称取10.5g一水柠檬酸溶于水中到1000mL。 

4、酪蛋白溶液 
称取1g干酪素(酪蛋白),加到80mL 0.05mol/L磷酸氢二钠溶液中(溶液3.1),在沸水 
浴中加热并不时搅拌,至完全溶解,冷却到室温,并加入0.05mol/L柠檬酸调到pH=6.0。在 加入柠檬酸时要迅速搅拌,防止蛋白局部凝聚。然后以水定容到100mL。当天配制。 

5、磷酸盐—半胱氨酸EDTA缓冲溶液 
称取8.95g十二水磷酸氢二钠以400mL水溶解,加入7.0gEDTA-Na盐(乙二胺四乙酸二钠) 
和3.05g半胱氨酸盐酸盐一水化物溶解后,以1mol/L氢氧化钠/HCL调节pH6.0并定容至 
500mL。冰箱4℃保存三天。
 
6、0.4mol/L三氯乙酸(CCl3C00H)溶液,称取65.4g三氯乙酸,用水溶解并定容至l000mL。 

7、0.1mol/L盐酸溶液 吸取9mL盐酸,用水溶解并定容至1000mL即得。 

8、50μg/mL L-酪氨酸标准溶液: 精确称取预先在105℃干燥至恒重的L-酪氨酸0.05g(±0.001g)置于1000mL容量瓶中;用0.1mol/L盐酸(3.6)溶解并稀释至刻度,成为每mL含酪氨酸50μg的标准液。

紫外分光光度计

紫外分光光度计

木瓜raybet雷竞技酶活检测方法
1、精确称取1.000g样品至50mL的试管中,加磷酸盐半胱氨酸EDTA缓冲液(3.4)24mL,于漩涡混合器中震荡3-4次至完全溶解,浸提10min后,中速定性滤纸过滤,取上清液用上述缓冲液(3.4)稀释到适当倍数待测。稀释倍数为估计酶活除以10,使吸光度值接近As。 

2、取试管二支,分别吸取 2.0mL 酶液于其中,在 40±0.1℃水浴中预热 5 分钟,其中一 
支加入同时预热的酪蛋白(3.3)溶液 2mL,混匀,40±0.1℃准确反应 10min 后,加入 4mL 
三氯乙酸溶液(3.5)终止反应,摇匀,取出静置 10min,用中速定性滤纸过滤,若滤液不 
清澈需再过滤,以水作空白,记录在 275nm 波长处用紫外分光光度计测定的滤液吸光度值 
AE。 

3、空白制作:吸取 2.0mL 酶液,先加入 4.0mL 三氯乙酸溶液(3.5)使酶灭活,10min 后 
加酪蛋白溶液(3.3)2.0mL 摇匀,取出静置 10min 中速定性滤纸过滤,按上述法测得吸光 

度 AS。 同时测定酪氨酸标准液(3.7)在 275nm 波长处的吸光度为 A0。 

木瓜raybet雷竞技检测报告

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以上是小编分享木瓜raybet雷竞技酶活力检测方法,除了掌握上述检测方法外,精准的检测还得需要专业的检测设备、熟练的手法及专业检测人员,如果您不具备上述几个条件,可以把酶活力检测交给我们完成,我们拥有丰富的检测经验,完全可以满足精准苛刻的检测需求。

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